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微流控芯片对血管紧张素原基因多态性的研究
作者:刘兆奕  刘丽敏  
单位:沈阳医学院附属沈洲医院心血管科 
关键词:微流控芯片  基因诊断  原发性高血压  血管紧张素原基因  多态性 
分类号:
出版年,卷(期):页码:2009,26(5):502-504
摘要:

目的:以微流控芯片为平台,以激光诱导荧光为检测手段,旨在探索AGT基因[G(-6)A]位点基因多态性在沈阳地区人群中的分布及与原发性高血压的关联,并为大规模人群基因多态性分析提供一高效、快速和灵敏的检测技术。方法:采用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCR-RELP)的方法,分别运用微流控芯片电泳与琼脂糖凝胶电泳对沈阳地区汉族人群103例正常人与123例高血压患者AGT基因(-6)位点的多态性进行分析。结果:(1)微流控芯片能在250s内对AGT基因PCR产物酶切片段进行芯片电泳分析;(2)沈阳地区正常对照组与高血压组中AGT基因(-6)位点A等位基因均有较高的发生频率(0.7038,0.7073),突变位点多态性无统计学差异(χ2=0.024,P>0.05)。结论:(1)微流控芯片同琼脂糖凝胶电泳相比,分析速度比凝胶电泳快,耗样量少,检测灵敏度高;(2)沈阳地区汉族人群中AGT基因核心启动子区域-6位点等位基因A有较高的分布频率,但G/A的基因变异EH发病不相关联,此位点可能仅仅是一个基因多态性标志。

Objective:To investigate the AGT gene polymorphism distribution and the relationship between the AGT gene polymorphism and essential hypertension(EH)in Shenyang Hans population using the new microchip-based method,then to develop a microchip-bases electrophoretic method for rapid detection of genotype.Methods:One hundred and twenty-three patients with EH and one hundred and three controls recruited from Shenyang Hans population respectively were examined.The gene polymorphisms of AGT[G(-6)A]was determined by polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP)with microchip electrophoresis and agarose gel electrophoresis.Results:(1)Microchip electrophoresis could separate PCR products of AGT gene within 250s.(2)The A allele frequency was very high in both groups(control:0.7038,hypertensive:0.7073),it was almost identical in the different groups(χ2=0.024,P>0.05),there was also no significant difference in frequencies of the allele of G(-6)A between Shenyang and Tibetan population(P>0.05).Conclusions:(1)In comparison with gel electrophoresis the new microchip-based method had the features such as high seperation efficiency,smaller sample volume requirement,high-throughput application as well as the sensitivity of detection.(2)Shenyang Hans population had higher frequency of A allele in AGT gene(-6)site.G/A polymorphism exists at locus-6 of human AGT gene,which was not linked to hypertension in Shenyang Han people.

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