骨肉瘤是一种好发于青少年的临床常见的原发性恶性骨肿瘤，其恶性程度高、转移时间早、进展快、预后较差，目前尚无有效的治疗方法。近来研究发现，骨肉瘤的发生、发展是细胞增殖失控、分化异常及细胞凋亡失衡相互作用的结果，因此，研究骨肉瘤相关因子的调控机理，明确这些因子在骨肉瘤发生、发展及治疗中的生物学作用，能够为有效治疗骨肉瘤提供新思路。

1与骨肉瘤发生相关的基因

11抑癌基因的改变（1）P53基因：P53基因是最常见的抑癌基因，若其发生突变，丧失了监督细胞凋亡的作用，则可导致人体多种肿瘤的发生。研究显示P53基因变异在骨肉瘤中约占22%；P53基因的变异被证实涉及骨肉瘤分子机制\[1\]。近年来，P53基因变异已被证明可导致DNA修复机制破坏且扰乱抗血管生成活性，并证实P53基因与骨肉瘤的发生具有明显相关性。在P53基因缺失的骨肉瘤细胞链研究中发现，腺病毒介导的野生型P53基因转染可导致骨肉瘤细胞活性降低，同时增加了骨肉瘤细胞对化疗药物的敏感性\[2\]。有研究报道，P53基因与骨肉瘤分化程度相关，在低Rosen分级骨肉瘤中表达较高；也有报道认为，P53基因的变异与骨肉瘤的病理分级没有明显相关性\[3\]。（2）Rb基因：大量研究已证实，Rb肿瘤抑制因子的突变在骨肉瘤的发生和发展中起着重要的作用。Rb基因对细胞周期的控制极为关键，Rb蛋白通过与转录因子E2F结合而调节细胞周期；Rb基因的变异可引发包括骨肉瘤在内的一些肿瘤，增加了发生骨肉瘤的风险，而且Rb基因的丢失甚至可以解释骨肉瘤家族性风险；另有研究发现Rb 基因杂合性缺失与骨肉瘤的预后不良密切相关\[4\]。

12与骨肉瘤相关的原癌基因Myc基因是较早发现的一组癌基因，包括C\|myc、N\|myc、L\|myc 等，其中C\|myc原癌基因在细胞的增殖调节中发挥重要作用，可刺激细胞生长与分裂，其在骨肉瘤中有扩增及过度表达。Myc基因在骨髓间充质细胞的过表达可导致骨肉瘤的发展。Myc基因的过度表达还可影响抗肿瘤药物的疗效，如在骨肉瘤U2OS细胞中Myc基因的扩增可最大程度地抵抗多柔比星；而在甲氨蝶呤耐药变异的Saos\|2骨肉瘤细胞中，发现了Myc基因的表达，Myc基因的下调增强了甲氨蝶呤对骨肉瘤细胞的治疗活性；腺病毒介导转染抗Myc基因片段后，可导致细胞周期的停滞，且可提高MG\|63骨肉瘤细胞的凋亡\[5，6\]。

2与骨肉瘤生物学特性相关基因

21Bcl\|2基因Bcl\|2基因是目前研究较为广泛的凋亡调控基因之一，其通过广泛抑制各种刺激因素，诱导细胞凋亡、延长细胞活力而发挥生物学效应；当正常细胞的凋亡机制被破坏以后，就可能引发肿瘤的发生。Bcl\|2属于凋亡抑制基因范畴，也是重要的原癌基因，其通过作用于细胞凋亡信号通路而抑制细胞的凋亡、延长细胞的存活时间，从而为肿瘤的发展创造了机会。在Bcl\|2过度表达的基因研究中发现，Bcl\|2的过度表达对细胞的过度增殖与分裂并没有影响，而是延长了肿瘤细胞的生存时间。Bcl\|2的抑制凋亡作用，打乱了细胞的自身平衡机制，造成受损与突变的细胞未能及时被清除，进而发展为肿瘤\[7\]。对骨肉瘤与正常骨组织进行Bcl\|2检测的结果显示，Bcl\|2在骨肉瘤骨组织的阳性表达率高达70%，而在正常骨组织的表达率仅为20%\[8\]。

22转录因子AP\|1Ap\|1由Jun、Fos及ATF蛋白家族组成，AP\|1通过促进细胞增殖、抑制分化、促进肿瘤细胞的侵袭和转移等过程在肿瘤发生发展中发挥作用。研究发现Fos与Jun基因表达在骨肉瘤中明显上调，在骨肉瘤老鼠模型中，Ap\|1介导的转录抑制导致降低的迁移、侵袭和转移\[9\]。

23巨噬细胞移动抑制因子巨噬细胞移动抑制因子（MIF）是由活化T细胞产生的一种多功能细胞因子，其对巨噬细胞的移动发挥抑制功能，在机体炎症、免疫反应和肿瘤的发生发展中起重要作用。最新研究表明，MIF可参与肿瘤发生、发展和肿瘤血管形成，且在多数肿瘤中有高表达\[10\] ；MIF可通过激活相关信号通道促进肿瘤的发生发展，同时也可通过间接作用导致肿瘤微环境形成，进而导致肿瘤的产生。研究显示，MIF在结肠癌、肝细胞癌等多种恶性肿瘤中均呈高度表达；而肿瘤血管的形成及肿瘤的血性转移也与MIF有重要的关联性，在骨肉瘤组织标本检测中发现，MIF的表达水平与肿瘤微血管的密度具有相关性\[11\]。近年来研究表明，MIF可参与调节细胞的增殖和分化，并能刺激癌细胞分泌血管内皮生长因子 \[12\]。MIF的表达与骨肉瘤的发生、发展有重要联系，是判断骨肉瘤转移能力的重要指标。

24血管内皮生长因子血管内皮生长因子（VEGF）是最典型的促血管生成因子，可刺激血管内皮细胞增殖、迁移，诱导血管的再生与成熟。当VEGF与其受体结合时，引发多个不同的信号通道被启动，导致一氧化氮、磷脂酶Cγ、蛋白激酶C等的释放，由血管内皮细胞释放的一氧化氮可增加血管的通透性，而磷脂酶C、蛋白激酶C以及c\|Raf\|MEK\|MAPK信号级联反应的活化能够刺激内皮细胞的增殖，肌动蛋白细胞骨架的重排则可促进细胞的迁移。有研究表明，VEGF的表达水平与骨肉瘤微血管密度及转移有紧密的联系。原因是在增殖的肿瘤细胞周围存在一个缺氧与酸中毒的微环境，此种特殊的微环境条件可刺激von Hippel Lindau蛋白产生并释放低氧诱导因子HIF\|1α，而HIF\|1α可与VEGF启动子结合，进而上调VEGF的表达；同时转化生长因子\|α与成纤维细胞因子也对VEGF的表达具有上调作用\[13,14\]；此外，VEGF可调整基质金属蛋白酶与纤溶酶的活性，分解细胞外基质，进而释放与细胞外基质肝素粘蛋白结合的血管生长因子，VEGF也可对抗凋亡因子Bcl\|2，确保血管内皮的增殖\[15\]。

25基质金属蛋白激酶\|2细胞外基质（ECM) 是由胶原、糖蛋白、蛋白多糖及弹力纤维等大分子组成的网状结构，在组织细胞的生长分化中发挥重要作用，其是肿瘤侵袭转移中的一个重要屏障，肿瘤细胞在转移侵袭时必须通过这个屏障才能到达机体的其他部位。研究认为，ECM可被多种酶类所降解，其中被认为最重要的是基质金属蛋白酶（MMP），MMP属于锌肽酶超家族成员，几乎可降解ECM的所有成分结构，且是目前发现的唯一能降解纤维类的酶类；在多数恶性肿瘤的检测中，可发现基质金属蛋白激酶\|2（MMP\|2）的表达程度均明显增加\[16\]。MMP\|2主要参与细胞外基质的破坏，如在骨肉瘤中，MMP\|2破坏细胞外胶原，以利于肿瘤与内皮细胞的侵袭；另外，在MMP的作用下，血管壁的重塑可引发一个薄的、存在漏隙的血管网络产生，由此可导致肿瘤细胞进入血管腔；而MMP\|9可导致VEGF释放并聚集于细胞外基质，又进一步上调了MMP\|2的表达。

3展望

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